文章较长,20000多字,想深度了解猫瘟的猫友,可收藏本文。本文有一个精简版本。明天我将发出。另外文章配图涉及到不少解剖学案例,可能会引起不适,请谨慎阅读。


本文首次发表于2009年《猫医学杂志》

▍病毒

猫泛白细胞减少症病毒(FPV)是从狗、貂、浣熊、貉、狐狸和其他犬科动物中分离出的与之密切相关的细小病毒的原型(Parrish,1990)。

它们最初是以与它们隔离的宿主命名的。

目前的分类法将犬细小病毒和猫泛白细胞减少症病毒定义为独立实体(Tattersall,2006),但在本指南中,FPV指猫体内的细小病毒。


图1:细小病毒颗粒(病毒体)的电子显微照片©FredMurphy

病毒体含有单链基因组DNA,没有包膜(裸露),有时被染色穿透;它们的直径为18-22nm,呈二十面体对称,但在电子显微照片中似乎是圆形和六边形的。(图1)


图2:感染猫泛白细胞减少症病毒的猫肾细胞系(CrFK)中的核内含物;这种DNA病毒的复制发生在细胞核中。©NicolaDecaro

与大多数其他DNA病毒不同,细小病毒不能激活宿主细胞中的DNA合成。它们的复制位于细胞核内(图2、3),感染的细胞必须是活跃的有丝分裂细胞。这解释了为什么组织损伤主要发生在快速分裂的细胞中,如肠、骨髓和胚胎组织中的细胞。


图3:猫泛白细胞减少症病毒感染的猫肾细胞系(CrFK)的核免疫荧光:注意细胞质中没有病毒抗原。并非每个细胞都受到感染——细胞核的阴影是可见的。©NicolaDecaro

FPV会感染猫以及其他猫科动物,另外浣熊、水貂和狐狸也会遭遇感染(Steineletal.,2001年)。同样它也会感染狗,我们会在淋巴组织(胸腺,脾脏,骨髓)中发现FPV的复制,但是在肠道内不会,另病毒没有脱落(Truyen,Parrish,1992)

1978年,一种与FPV密切相关的新细小病毒首次在犬中被发现(Carmichael,2005)。它被命名为犬细小病毒病毒2型(CPV-2),以区别于1970年从狗身上分离出的另一种细小病毒,该病毒现在被称为"犬细小病毒1型".

CPV-2是通过获得5或6个氨基酸变化的衣壳蛋白基因(Parrish,1990;Truyen,1999)从FPV进化而来的,不再能够感染猫。然而,在进一步适应犬宿主的过程中,浣熊病毒获得了氨基酸的变化,这使得新病毒能够更好地与犬细胞受体结合,但也保留了它感染猫的能力(Hueffer、Parrish,2003;Allisonetal.,2012)。这导致了新型CPV-2a的产生,获得了进一步的突变,包括VP2的氨基酸426的突变,这些突变决定了不同的抗原类型2a、2b和2c.

目前在世界各地的狗群中传播的细小病毒——在遗传学和抗原学上定义为CPV-2a、-2b和-2c型——可以感染猫,甚至可能导致疾病(Truyenetal.,1995,1996;Mochizukietal.,1996)

然而,被CPV感染的猫在欧洲和美国是罕见的,该病毒只偶尔在诊断材料中发现(Truyenetal.,1996)。经过无数次盲传,从猫外周血淋巴细胞中分离出犬细小病毒,并用聚合酶链反应(Ikedaetal.,2000)证实了病毒DNA。然而,最近在葡萄牙发现了一例有严重临床症状的猫感染CPV-2c的病例(Mirandaetal.,2014)

在从FPV到CPV-2及其各种抗原类型的演变过程中,中和表位受到影响,使得FPV抗血清的交叉中和作用明显降低(TruyenandParrish,2013)

▍流行病学

FPV无包膜,对物理因素和化学物质有很强的抗性。在受污染的环境中,它可能保持几周甚至几个月的传染性(Uttenthaletal.,1999)。患病的食肉动物在高滴度(高达109TCID50/克粪便)时释放病毒,病毒迅速在避难所和猫舍中累积。由于这种病毒具有高度传染性,即使经过看似彻底的消毒处理,易感群体仍有可能被感染。因此,建议只有成功接种疫苗的猫才允许进入到这种环境。

虽然关于FPV流行率的数据很少,但猫舍和避难所面临更大的风险。(Addieetal.,1998;Caveetal.,2002)

持续的感染和持续的病毒脱落是罕见的;使用PCR,健康猫的粪便发现持续数周的阳性结果;尚不清楚这是否具有流行病学意义(Jakeletal.,2012)

有趣的是,CPV-2病毒还在两个英国避难所的猫中被分离出来,而这两只猫很健康。尚不清楚这是否具有流行病学重要性()

在宫内感染后,FPV抗原在小猫的小脑中存在数周(Csizaetal.,1971)

对从野生食肉动物(美洲狮、郊狼、浣熊等)身上发现的细小病毒序列的分析揭示了广泛的病毒类型。而这些捕食者感染的原因很可能是因为他们的猎物感染了细小病毒造成了,如果能进一步证实这个假定事实的话,那么这很可能是病毒传播的另外一条新的途径。


图4:猫泛白细胞减少症病毒感染引起的出血性肠炎。©

▍发病机制

FPV会引起全身感染。病毒通过粪口途径传播,最初在口咽组织中复制,然后通过无细胞病毒传播到几乎所有组织。细小单链DNA的复制需要处于分裂S期的细胞,因此仅限于有丝分裂活性组织;在肠道中,这导致肠炎(图4,5)。细小病毒需要细胞DNA聚合酶来合成互补DNA链,这是复制的第一步,也是转录的先决条件。


图5:猫泛白细胞减少症病毒感染引起的肠道损伤:肠上皮脱落和纤维蛋白“铸型”非常突出©

该病毒感染淋巴组织,在那里它可能导致细胞衰竭和功能性免疫抑制。淋巴细胞减少症可能是淋巴细胞溶解的结果,也可能是淋巴细胞向组织迁移的间接结果。骨髓受到影响,早期祖细胞中的病毒复制已经被描述,对几乎所有骨髓细胞群体都有显著影响(Parrish,1995)

“泛白细胞减少症”,即所有白细胞数量的缺乏便是结果(Truyen、Parrish,2000)


图6:FPV感染后对肠道上皮的损伤(左),绒毛几乎消失了。为了比较,右图为正常的肠道。

FPV复制的特点是肠绒毛的缩短,这是由于肠道上皮细胞有时完全丧失(Parrish,2006)。病毒在Lieberkühn隐窝中快速分裂的细胞中复制,损害上皮细胞的再生并导致上述损伤(图6)。它们的严重程度与上皮细胞周转率有关,并且与肠道病毒(如猫冠状病毒)合并感染可能会增加疾病的严重程度。


图7:猫泛白细胞减少症病毒在子宫内感染的小猫小脑发育不良©

宫内传播或围产期感染可能会影响中枢神经系统的发育。“猫共济失调综合征”是由于小猫Purkinje细胞溶解性感染导致小脑发育受损的结果(图7、8;)

一种类似于FPV的病毒被描述为怀孕狐狸生殖障碍的原因(Veijalainen、Smeds,1988)


图8:猫泛白细胞减少症病毒在子宫内感染的小猫小脑发育不全(下图);而上图为发育正常的大脑。©DianeAddie

胎儿感染可能诱导免疫耐受,使小猫继续长时间地散播病毒(Pedersen,1987)

妊娠35至45天感染的胎儿降低了T淋巴细胞介导的免疫。在成年猫中,感染会导致免疫反应短暂下降:中性粒细胞数量严重减少,淋巴细胞从循环、淋巴结、骨髓和胸腺中消失(Pedersen,1987;Ikedaetal.,1998)


▍免疫

1.通过初乳获得的被动免疫

在小猫身上,母体抗体的生物半衰期约为十天(Scottetal.,1970年;Pedersen,1987)

当抗体下降到低于40-80的滴度时(通过血凝抑制法测量),它们不能可靠地防止感染,但可能会干扰主动免疫(图9)

大多数猫在第6到8周之前都有保护性抗体。后来的免疫是有效的(Dawsonetal.,2001),因此我们建议在15-16周龄时给猫接种疫苗。


图9:在这个例子中,关键时期在产后8周到12周之间。

猫的内皮胎盘植入限制了溶质的母胎通过,IgG只能在妊娠最后三个月穿过胎盘屏障。这种免疫球蛋白转移占小猫母体免疫的10%。因此,摄入足够的初乳对于从母猫那里获得保护水平的中和抗体至关重要。最大吸收是在生命的8小时左右。之后,小猫的肠道细胞被新的上皮细胞取代,不再吸收和转运抗体。

小猫血清抗体滴度通常是母猫抗体滴度的一半。它们的水平取决于个体初乳摄入量,这解释了同窝小猫之间的巨大差异。在生命的最初几周,由于衰变和生长中有机体的稀释,滴度将下降。与犬细小病毒相似,当抗体水平太低,无法抵御自然感染,但仍高到足以干扰疫苗接种时,6-10周左右就会出现免疫缺口期(也就是说这段时间小猫的免疫力最弱,但是你还不能给打疫苗)

2.针对FPV的主动免疫应答

抗体在FPV的免疫反应中起着重要作用。母源抗体(MDA)能有效保护小猫免受致命感染。这种被动获得的免疫后来被通过接种疫苗或自然感染获得的主动免疫应答所取代。

获得性免疫是牢固和持久的(Thiry,2002a),可以通过灭活和改良活病毒(MLV)疫苗诱导。FPV抗血清可用于被动免疫,当未接种疫苗的动物在疫苗诱导的主动反应开始前可能接触病毒时,FPV抗血清可用于被动免疫(Barloughetal.,1997)

细小病毒引起一系列免疫反应,包括辅助T-CD4+淋巴细胞和CD8+细胞毒性T淋巴细胞。细小病毒的摄取通过吞噬作用发生,但也通过其他非吞噬机制发生,如液体胞饮作用或受体介导的内吞作用(Sedliketal.,2000)

▍诊断

在实践中,粪便中的FPV抗原检测通常采用商业上可用的乳胶凝集或免疫层析检测(Veijalainenetal.,1986;Addieetal.,1998)

与参考方法相比,这些测试具有良好的特异性和可接受的敏感性(Neuereretal.,2008;Schmitzetal.,2009)。

市售用于检测FPV抗原的试纸以及用于检测犬细小病毒抗原的试纸都可用于诊断粪便中的FPV。

由于更快速和自动化的替代方法,电子显微镜诊断已经失去了它的重要性。专业实验室提供基于PCR的全血或粪便检测。通过PCR,健康猫在数周内粪便中检测呈阳性,但这一发现的流行病学意义尚不清楚。临床医生在解释诊断数据时需要牢记这一点。


图10:这只小猫严重脱水,因FPV而失去电解质。


图11:FPV中的脱水与高死亡率密切相关。

▍疾病管理

临床表现为猫泛白细胞减少症的猫,如有实验室证据证实,应隔离饲养。支持性治疗和良好的护理可显著降低FPV引起的死亡率。严重脱水加速疾病进展(图10,11)。液体和电解质的恢复,以及酸碱平衡的恢复,优选通过静脉滴注,在对症治疗中是最重要的(图12)


图12:需要重症监护

由于肠道屏障经常在FPV感染的猫中被破坏,肠道细菌可能会侵入血液。现有的中性粒细胞减少症可能导致细菌血症,并导致这些免疫功能低下的患者出现败血症。

预防败血症至关重要,建议使用具有抗革兰氏阴性和厌氧菌功效的广谱抗生素。比如阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林与氨基糖苷类、氟喹诺酮类、头孢菌素类或哌拉西林/他唑巴坦组合。应考虑这些药物的潜在副作用。抗生素应该肠胃外给药(优选静脉注射)。

只有在呕吐持续的情况下,才应该限制水和食物的口服摄入,进食应该尽可能长的时间持续,并尽快重新开始。关于早期肠内营养的有益作用,已经早有报道(Mohretal.,2003)。易消化的食物是首选,但是如果猫不接受,任何食物都比不吃要好。如果呕吐持续存在,应该考虑使用止吐药。维生素补充剂,特别是B族维生素复合物,可防止不经常发生的硫胺素缺乏症。

发生低蛋白血症的猫可能需要血浆或全血输血来恢复渗透压。血浆输注与肝素联合可以控制弥散性血管内凝血(DIC),因为它补充抗凝血酶III和其他重要的血浆蛋白。对于厌食症或表现出严重呕吐和/或腹泻的猫,或持续低蛋白血症的患者,需要全部或部分胃肠外营养,优选通过颈静脉中的中心静脉导管(Hartmann,Hein,2002)


抗FPV血清可用于预防暴露后易感动物的感染。免疫血清的治疗效果已经在狗身上得到证实(Meunieretal.,1985),猫也可能会有类似的效果。

猫重组干扰素-ω治疗犬细小病毒性肠炎疗效显著(Minagawaetal.,1999;Martinetal.,2002;DeMarietal.,2003),并在细胞培养中抑制FPV的复制。但到目前为止,还没有关于它对FPV感染猫的疗效的数据。

由于FPV的极端物理化学稳定性,被污染的笼子、猫砂盆、食物盘、水碗、鞋子和衣服会在传播中扮演重要角色。因此,注重卫生至关重要。这种病毒对许多普通消毒剂有抵抗力,但可以被含有过乙酸、甲醛、次氯酸钠或氢氧化钠的产品灭活。商用化学消毒剂被证明对无包膜病毒有效,另外基于甲醛或过乙酸的消毒剂(溶液或干雾)可以用于房间消毒。

易感小猫和未接种疫苗的老年动物在接受适当免疫之前,不应与其他猫接触。一旦疾病爆发,被动免疫可以用来保护易受感染的猫(有不完全疫苗接种史的幼猫、缺乏初乳的小猫或未接种疫苗的猫)。抗FPV血清可以皮下或腹膜内给药,可以保护2-4周。如果使用马源的商品,不建议重复给药,因为这会导致过敏反应。由于所施用的免疫球蛋白将与细小病毒表位结合,因此这些动物在被动免疫后的头三周内不应接种疫苗。

▍关于疫苗类型和接种程序的一般建议

弱毒苗和灭活苗均可通过注射给药,并且均提供对疾病的有效免疫。在能够产生适当反应的免疫能力强的猫中,弱毒疫苗通常会导致更快的保护(Levyetal.,2006)。然而,即使是单一剂量的灭活疫苗也可能在短时间内迅速诱导幼猫的良好抗体反应(Fischeretal.,2007)。

没有数据表明特定疫苗品牌比其他品牌更有效。

在大多数情况下,选择任何一种类型的疫苗都是可以的,个体猫一般无特殊需求。另外弱毒苗已经被广泛的推广和使用,因为它们能够产生更快速的免疫应答。但是以下几个情况需要特殊考虑:

弱毒FPV疫苗不应该用于怀孕的母猫,因为病毒有可能会透过胎盘传播到胎儿体内,并对发育中的小脑造成损害(Pollock、Postorino,1994)。在一些国家,可以用灭活苗给孕猫接种,但是非特殊情况不要接种,接种要遵循具体规则。在《纯种猫繁育的核心秘密》中有所涉及这方面的深入探讨。

弱毒FPV疫苗绝不能用于4周以下的小猫,原因相同:为了避免对小脑的损伤,小脑仍在年轻的新生儿中发育(Pollock、Postorino,1994)

由于病毒的普遍存在和感染的严重后果,建议每只猫接种疫苗:FPV疫苗被定义为核心疫苗。即使是仅在室内生活的猫也不能总是避免遇到FPV,因为这种病毒在环境中非常稳定,可以在污染物上传播(Pollock、Postorino,1994),比如你去了躺宠物医院或者宠物市场,回家后,衣服上携带了猫瘟病毒。

▍基本的疫苗接种程序

大多数小猫在出生的头几周都受到MDA(从母猫那里获取的抗体保护)的保护。然而,如果没有血清学检测,小猫的保护水平和对感染的敏感程度或对疫苗免疫反应的程度是未知的;此外,个体之间也有相当大的差异。

一般来说,在小猫8-12周的时候,MDA会下降到能够产生积极免疫反应的水平,通常建议在8-9周开始接种疫苗,3-4周后进行第二次接种。许多疫苗的数据表包含这方面的建议。然而,MDA差的小猫在幼年时可能很脆弱(并且能够对疫苗接种做出反应),而其他小猫可能MDA又很高,以至于它们在12周后的某个时候才会做出反应。

因此,没有单一的基本疫苗接种程序涵盖所有潜在的情况。以下是ABCD的建议:

所有小猫都应该接种FPV疫苗。

应给药三剂,一剂在8至9周龄,第二剂在3至4周后,第三剂在3至4周后(至少16周龄)。16周龄的第三次疫苗接种对猫舍和避难所的小猫非常重要。

母源抗体在一些猫身上可能会持续到第12周以后(Dawsonetal,2001;Jakeletal,2012),这样12周的疫苗接种可能无法诱导保护(Kruseetal.,2010)。

如果不可能预防性给予免疫球蛋白,应考虑进行额外的早期接种,特别是如果已知或怀疑MDA较差或小猫处于高风险状态(EBMI级)。如果小猫在4周龄或之前接种疫苗,则应仅使用灭活产品进行,并且可以每隔3至4周重复接种疫苗,直至≥12周龄。

小猫初次接种疫苗后,所有猫在10至16个月大的时候都要增强一针;这将确保对可能对基本疫苗程序没有充分反应的猫有足够的疫苗诱导免疫。

未知接种状态的成年猫应该接受一次弱毒FPV疫苗,然后一年后再接种一次。

▍再次接种疫苗

在实验环境中,对FPV疫苗有反应的猫在没有任何重复疫苗接种或自然挑战的情况下,至少保持了7年的稳定免疫——这是最近测试的时间点(ScottandGeissinger,1999;Lappinetal.,2002;EBMgradeII)。然而,ABCD建议以后每隔三年进行一次再接种,除非有特殊情况。

虽然猫泛白细胞减少症的大多数病例是由FPV感染引起的,但是犬细小病毒(CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c)的变体已经出现,这些变体会感染猫并可能导致疾病。目前的FPV疫苗似乎提供了针对这些新CPV变体的保护(Chalmersetal.,1999;Nakamuraetal.,2001;EBMgradeII)

▍特定情况下的控制

猫白细胞减少症是一种这样的疾病。FPV已经重新成为欧洲和美国避难所和救援院中猫死亡的原因。除少数例外情况外,所有4至6周龄的小猫和猫应该接种疫苗,无论居住环境如何。

对于生病或怀孕的猫,任何关于疫苗接种的决定都必须针对这只猫进行具体分析,分析完毕且理由充分后尽快接种疫苗。怀孕的猫不应该接种弱毒苗。或者,可考虑用FPV抗血清进行被动免疫(或抗CPV-2犬球蛋白)。

小猫应该在4周龄时开始接种疫苗,否则就在6周龄时接种疫苗。建议使用弱毒疫苗,因为它们起效更快,克服母体抗体的功效更大,并且更有可能赋予足够的免疫力。虽然人们已经对菌株逆转毒性提出了担忧,但这一点从未被记录过。

疫苗接种应每3至4周重复一次,直至16周龄。如果成年猫在初次接种疫苗时生病或受到其他危害,当猫再次健康状况良好时(至少在初次疫苗接种后两周),应考虑再次注射。

身份不明的猫不应该被安置在一起。

被动免疫可以在避难所使用。如果存在其他疾病或在感染压力高的环境中,它在入所时很有用,因为它能提供即时保护。免疫球蛋白预防感染的功效,包括FPV,已经在大约50年前的实验研究和数据中得到证实。这取决于针对特定试剂的抗体滴度、给药量、抗体在控制特定感染中的重要性以及给药时间。

用于猫的多价超免疫免疫球蛋白制剂在一些欧洲国家可商购获得-含有针对FPV,FHV-1和FCV的抗体的马血清。它们用于预防(通常一次注射1小瓶)和治疗(通常每24小时皮下注射1次小瓶,共三次)。保护持续约3周。在此期间,必须避免主动免疫(疫苗接种),因为免疫球蛋白将与疫苗抗原结合,将它们与免疫复合物结合。虽然给予大量外来蛋白质,但如果猫是第一次接受治疗,过敏反应和副作用会很少。不鼓励重复治疗(间隔超过1周)因为猫会对马蛋白产生过敏反应。(HartmannandHein,2002).

可制备和使用定制的同源(高)免疫血清。血清来自健康的猫或从一种疾病中康复的动物群体,而高免疫血清来自反复接种过疫苗的动物。这种血清的抗体含量和保护时间尚不清楚。

像所有外源蛋白一样,给药的抗体很快从体内被消除。

猫科动物免疫血清可以在兽医实践中制备,但是献血者必须接受隐性感染的筛查(例如FIV、FeLV、Bartonella感染)。献血者和接受者的血型应该匹配。保护所需的最低剂量未知,但猫的推荐剂量是每公斤体重2至4毫升血清。在收集、储存和给药过程中,必须注意无菌。颈静脉穿刺是首选,颈静脉上方的区域应该被刮去并消毒。血液应该被收集(至少是所需血清量的两倍)到没有添加剂的无菌试管中,并允许凝结。血清可以在-20℃下以单剂量等份储存,因为IgG非常稳定,如果收集后立即冷冻,可以保存长达一年(LevyandCrawford,2000;EBMgradeII)。通常,血清是皮下给药的;腹腔注射在小猫身上更可行。如果需要立即静脉注射,应该使用血浆(而不是血清)(GreeneandSchultz,2005).

由于FPV和CPV是高度交叉中和的密切相关的病毒,因此可以预期针对CPV产生的高免疫血清对FPV也有效。在没有商用抗FPV血清的国家,这一点尤为重要。

▍猫舍

上述接种计划同样适用于猫舍。未及时接种疫苗的母猫可能在繁殖前接受强化疫苗注射,以最大限度地向小猫提供帮助(LawlerandEvans,1997;EBMgradeI)

这些母猫的小猫需要在16到20周的时候额外接种增强苗,因为多药耐药性持续时间更长。如前所述,应尽量避免对孕妇进行常规疫苗接种。非要接种一定要遵循一定规则。

▍免疫缺陷猫的疫苗接种

疫苗不能在免疫功能受损的动物身上产生最佳保护。这种情况包括遗传免疫缺陷,但也包括营养不足、系统性疾病、免疫抑制药物的同时施用以及环境压力。应努力在接种疫苗前纠正后一种情况,并保护猫不被感染,如果可能,在接种疫苗前纠正这些情况;如果不能保证这一点,疫苗接种仍应进行,并在动物完全恢复后重复进行。

对于免疫受损的个体,推荐使用灭活FPV疫苗。弱毒FPV疫苗应该谨慎用于免疫功能严重受损的个体,因为病毒复制无法控制可能会导致临床症状。

在接受皮质类固醇治疗的猫中,应该仔细考虑接种疫苗。根据治疗的剂量和持续时间,皮质类固醇可能会导致特别是细胞介导的免疫反应的功能抑制,但是缺乏相关的研究。在狗身上,如果以低至中等剂量短期给药的话,皮质类固醇不会妨碍有效免疫,(Naraetal.,1979;EBMgradeIV)。然而,接种疫苗时一般应避免使用皮质类固醇。

患有慢性病的猫有时可能需要接种疫苗。制造商评估疫苗在健康动物中的安全性和有效性,并相应地标记他们的疫苗仅用于健康动物。尽管如此,患有慢性疾病如慢性肾病、糖尿病或甲状腺机能亢进症的猫应该以健康猫同样的频率接受疫苗接种。相比之下,患有急性疾病、虚弱或高烧的猫不应该接种疫苗。非要接种,要使用灭活苗。

感染逆转录病毒的猫应留在室内并隔离,以减少感染其他猫的可能性,并减少暴露于其他传染媒介。感染FeLV的猫应接种FPV疫苗。虽然没有证据表明感染FeLV的猫因弱毒疫苗残留毒力而导致疫苗诱发疾病的风险增加,如果有的话,灭活产品是首选。感染FeLV的猫可能无法对狂犬病疫苗产生足够的免疫反应,因此也许也不能对其他疫苗产生免疫反应。所以,应该在这些猫中考虑更频繁的疫苗接种。

只有暴露于传染性病原体的高风险的FIV猫才应该接种疫苗,而且只能接种灭活产品。

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